Untitled Document
 
 
 
 
Untitled Document
Home
Current issue
Past issues
Topic collections
Search
e-journal Editor page

Production of Truncated Recombinant Dengue Virus Envelope Protein and its Immunogenicity in BALB/c Mice

การผลิตโปรตีนเอนวิโลปสายสั้นจากเชื้อไวรัสเดงกี่และความสามารถในการกระตุ้นภูมิคุ้มกันในหนู BALB/c

Chonlatip Pipattanaboon (ชลทิพย์ พิพัฒนาบูรณ์) 1, Piyathida Natsrita (ปิยะธิดา นาทศรีทา) 2, Khwanchit Boonha (ขวัญจิต บุญหา) 3, Surachet Benjathummarak (สุรเชษฐ์ เบญจธรรมรักษ์) 4, Pannamthip Pitaksajjakul (ปานน้ำทิพย์ พิทักษ์ สัจจะกุล) 5, Pongrama Ramasoota (พงศ์ราม รามสูต) 6




หลักการและวัตถุประสงค์: โรคไข้เลือดออกเดงกี่เป็นปัญหาทางสาธารณสุขที่สำคัญในประเทศเขตร้อนและกึ่งร้อนชื้น เชื้อไวรัสเดงกี่ทั้ง 4 สายพันธุ์ก่อให้เกิดโรคที่มีอาการรุนแรงแตกต่างกันไป ในปัจจุบันยังคงมีการวิจัยและพัฒนาวัคซีน ยารักษา และชุดตรวจวินิจฉัยให้มีประสิทธิภาพที่ดีขึ้นอย่างต่อเนื่อง โปรตีนเอนวิโลป (envelope protein; E) เป็นโปรตีนเป้าหมายหลักของการตรวจจับโดยแอนติบอดีและเป็นสารกระตุ้นภูมิคุ้มกันที่ดี วัตถุประสงค์ในการศึกษาวิจัย คือ ผลิตโปรตีน rE74-118 จากสารพันธุกรรมของเชื้อไวรัสเดงกี่สายพันธุ์ที่ 2 และศึกษาคุณสมบัติเบื้องต้นของโปรตีนทั้งในหลอดทดลองและสัตว์ทดลอง

วิธีและผลการศึกษา: ผลิตโปรตีน rE74-118 ด้วยวิธีการโคลนนิ่งใส่พลาสมิด pET-32b และแสดงออกโปรตีนในเชื้อแบคทีเรีย Escherichia coli (SHuffle) หลังจากนั้นทำโปรตีนให้บริสุทธิ์ ได้ความเข้มข้นของโปรตีน 5.8 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร ทำการทดสอบคุณสมบัติของโปรตีนในการจับจำเพาะกับโมโนโคลนอลแอนติบอดีและซีรั่มของผู้ป่วยโรคไข้เลือดออกเดงกี่ และนำไปทดสอบความสามารถในการกระตุ้นภูมิคุ้มกันในหนู BALB/c พบว่าโปรตีน rE74-118 สามารถจับกับโมโนโคลนอลแอนติบอดีและซีรัมของผู้ป่วยได้อย่างจำเพาะ และสามารถกระตุ้นภูมิคุ้มกันแบบสารน้ำในการต้านเชื้อไวรัสเดงกี่สายพันธุ์ที่ 2 ได้ในระดับอ่อนๆ และไม่เพิ่มความไวในการติดเชื้อ

สรุป: โปรตีน rE74-118 มีคุณสมบัติในการจับจำเพาะ (antigenicity) และมีความสามารถในการกระตุ้นภูมิคุ้มกัน (immunogenicity)

Background and objective: Dengue is a major public health problem in tropical and subtropical countries. The four dengue virus serotypes can cause a wide range of mild to severe diseases. Many research and development efforts are ongoing to find a better effective and accessible version of vaccine, therapeutic agent, or diagnostic tool. Envelope (E) protein is a primary target for serologic diagnosis and immunization. This work aimed to express and characterize truncated E (rE74-118) protein of dengue virus serotype 2 (DENV-2) in both in vitro and in vivo properties.

Methods and results: A truncated DENV-2 envelope E protein, amino acid sequence 74-118, encoding gene was amplified and cloned into the pET-32b plasmid. The recombinant plasmid was then expressed in Escherichia coli (SHuffle) to produce the recombinant protein rE74-118. Recombinant E protein in truncated form (rE74-118) was successfully constructed, expressed, and purified in the concentration of 5.8 mg/ml. The rE74-118 protein was tested for its specificity with an anti-E monoclonal antibodies and dengue patient sera.  Furthermore, its immunogenicity in BALB/c mice was also tested. The results showed that the rE74-118 protein can specifically react to anti-E monoclonal antibodies and dengue patient sera. This protein also induces the humoral response with a low-level of neutralizing activity against DENV-2, as well as the protein do not show enhancing activities against all four serotypes. 

Conclusion: The truncated rE74-118 protein showed both antigenic and immunogenic properties in these in vitro and in vivo characterizations.

 

. . . Full text.
Untitled Document
Article Location

Untitled Document
Article Option
       Abstract
       Fulltext
       PDF File
Untitled Document
 
ทำหน้าที่ ดึง Collection ที่เกี่ยวข้อง แสดง บทความ ตามที่ีมีใน collection ที่มีใน list Untitled Document
Another articles
in this topic collection

Incidence of Positive Culture form Catheter Tip after Endotracheal Tube Suctioning Uning Disposable VS. Sterilized Reusable Gloves (การศึกษาเปรียบเทียบอัตราการเพราะเชื้อได้ผลบวกจากปลายสายดูดเสมหะจากท่อช่วยหายใจเมื่อใช้ถุงมือปราศจากเชื้อในห้องผ่าตัดโรงพยาบาลศรีนครินทร์)
 
Enterotoxins, TSST-1 Production and Drug Semsitivity Of Staphyrococcus aureus Isolated from Hospital Staffs And Medical Student in Srinagarind Hospital (Enterotoxins, Toxic shock syndrome toxin- 1 และความไวต่อยาของเชื้อ Staphylococcus aureus ที่แยกจากบุคลากรโรงพยาบาลและนักศึกษาแพทย์ โรงพยาบาลศรีนครินทร์ )
 
Diarrhea due to Vibrio cholera 0139 in Srinagarind Hospital (โรคอุจจาระร่วงอย่างแรงจากเชื้อ Viabrio cholera 0139ในโรงพยาบาลศรีนครินทร์ )
 
Ebola Virus (อีโบลา)
 
<More>
Untitled Document
 
This article is under
this collection.

Microbiology
 
 
 
 
Srinagarind Medical Journal,Faculty of Medicine, Khon Kaen University. Copy Right © All Rights Reserved.
 
 
 
 

 


Warning: Unknown: Your script possibly relies on a session side-effect which existed until PHP 4.2.3. Please be advised that the session extension does not consider global variables as a source of data, unless register_globals is enabled. You can disable this functionality and this warning by setting session.bug_compat_42 or session.bug_compat_warn to off, respectively in Unknown on line 0